高雄醫學大學醫學系病理學科- 柏氏染色(Papanicolaou stain)
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柏氏染色(Papanicolaou stain) · 1.固定 · 2.核染色 · 3.細胞質染色 · 4.透明,這些原理是用不同的溶液來進行水化、脫水和浸潤。
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柏氏染色(Papanicolaoustain)
柏氏染色(Papanicolaoustain)
染色目的:
細胞的內部細微結構,經過特別的染色化學藥物作用之後,會起化學反應而產生特別顏色,經過染色的細胞其細胞核與細胞質的細微結構,有更清楚的輪廓在顯微鏡下辦認,以幫助作臨床診斷的參考。
檢驗方法原理柏式染色法主要有四個原理:1.固定 2.核染色 3.細胞質染色 4.透明,這些原理是用不同的溶液來進行水化、脫水和浸潤。
核染色:利用蘇木紫(Hematoxylin)來染核,一般有二種方法,一種是退行性染色法,用蘇木紫(Hematoxylin)來過染,然後用稀釋過的0.5%鹽酸來把超過的染色去除,然後用水把鹽酸沖洗掉,另一種是進行性染色,只染到需要的顏色強度便停止。
酸鹼平衡:利用鹼性的氨水溶液(Ammoniawater)來平衡前面步驟使用之鹽酸溶液之酸性。
細胞質染色:常用的二種合成染料,第一種是OrangeG(OG-6)分子量小,能很快穿透細胞質,會把角質(keratin)染成鮮橘色,第二種是EA50,由伊紅(Eosin)和Lightgreen所組成,伊紅染成熟的扁平細胞、核仁和纖毛,Lightgreen染代謝性強細胞,如深層、中層鱗狀上皮細胞和柱狀上皮細胞染成綠色或藍色。
分色:利用1%醋酸溶液(AceticAcid)及1%磷鉬酸溶液(PhosphotungsticAcid)將OrangeG(OG-6)與EA50染在細胞質之顏色區分。
固定:以95%Alcohol作固定液,至少30分鐘以上。
透明:最常用二甲苯(Xylene),目的是使細胞有透明度以利黎龤A,因二甲苯(Xylene)無色,化學性為惰性,折射率1.494,近似玻片1.515,與酒精和封片用的膠都相容的特性,能使顯微鏡的光源穿過染過色的細胞。
染色步驟:
RunningWater1分
Gill’sHematoxylin3分
RunningWater30秒
0.25%Acidalcohol10秒
RunningWater30 秒
Ammoniawater10秒
RunningWater5 分
50%Alcohol10 秒
75%Alcohol10 秒
95%Alcohol10 秒
OG-64 分
95%Alcohol15 秒
95%Alcohol15 秒
1%AceticAcid10 秒
1%PhosphotungsticAcid10 秒
EA-507分30 秒
95%Alcohol30 秒
95%Alcohol30 秒
100%Alcohol1 分
100%Alcohol1 分
100%Alcohol1 分
二甲苯2 分
二甲苯3 分
二甲苯5 分
封片
子宮頸抹片之柏氏染色
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stain. 添加到生字筆記. KK:[stеn] DJ:[stеin]. 動變: 過去式:stained 過去分詞:stained 現在進行時:staining. 名複: stains. 權威釋義.